Tests d’analyse biochimique du sérum
L’envoi d’échantillons biologiques doit respecter les protocoles établis par le service de messagerie ou de transport utilisé. Dans certains cas, le transport aérien exige le respect de la réglementation de l’Association internationale du transport aérien (IATA) relative aux matières dangereuses.
Les anticoagulants présents dans le plasma peuvent entraîner une augmentation ou une diminution des valeurs des analytes testés (par exemple, les échantillons contaminés par le potassium-EDTA présentent des concentrations de potassium artificiellement élevées et des concentrations de calcium diminuées) ; par conséquent, par défaut, c’est le sérum qui doit être présenté.
Toutefois, dans certains cas, le plasma hépariné peut être acceptable, voire nécessaire. Il est recommandé de consulter le laboratoire avant de prélever l’échantillon pour tout test ou espèce non routinier.
Comme la lipémie peut interférer avec un certain nombre de tests chimiques chez le chien et le chat, il est conseillé de mettre l’animal à jeun pendant 12 heures avant le prélèvement, sauf contre-indication médicale potentielle, comme dans le cas de patients pédiatriques ou de races de chiens toy.
Pour les échantillons de sérum, le sang doit être prélevé dans un tube de sérum (bouchon rouge) ou dans un tube séparateur de sérum (bouchon tigré). L’échantillon doit être maintenu à température ambiante pendant 20 à 30 minutes pour permettre la formation complète du caillot et sa rétraction. Une formation incomplète du caillot peut entraîner la gélification du sérum en raison de la formation latente de fibrine.
Le caillot doit être séparé du verre en bordant délicatement les parois du tube avec un bâtonnet applicateur pour détacher le caillot. L’échantillon doit ensuite être centrifugé à vitesse modérée (~450 rpm) pendant 10 minutes.
Si l’échantillon a été prélevé dans un tube séparateur de sérum, la centrifugation déposera une couche de gel polymère entre les cellules sédimentées et le sérum. La couche de gel doit être inspectée pour vérifier l’intégrité de la barrière, et il est recommandé de répéter la centrifugation en cas de fissure visible dans cette couche.
Si un tube de sérum (red-top) a été utilisé, le sérum doit être retiré et transféré dans un tube propre afin de minimiser les artéfacts (p. ex., la glycolyse dans le composant cellulaire de l’échantillon de sang peut entraîner une diminution artificielle de la concentration de glucose). Le sérum doit être réfrigéré ou congelé jusqu’à son analyse. Des retards dans l’analyse peuvent nuire aux résultats de plusieurs analytes.
Une manipulation brutale de l’échantillon ou une séparation incomplète des érythrocytes du sérum peuvent favoriser l’hémolyse, qui peut interférer avec certains tests. Pour les bilans chimiques, 0,5 mL de sérum sont généralement préférés, bien que les exigences minimales du laboratoire puissent varier et doivent être consultées pour des volumes de sérum < 0,5 mL.