Test rapide Leishmania Ac

Ce test est un immunoessai pour la détection qualitative des anticorps incluant IgG, IgM et IgA dirigés contre les espèces du complexe Leishmania donovani (incluant Leishmania infantum, agent causal de la Leishmaniose canine), dans le sérum ou le plasma. Ce test est destiné à être utilisé comme test de dépistage et comme aide au diagnostic de la Leishmaniose canine. Tout échantillon positif avec ce test devrait être confirmé par un test alternatif (disponible gratuitement dans notre laboratoire).
La Leishmaniose est une infection disséminée par le moustique Phlebotomus, qui acquiert l'infection en se nourrissant d'animaux infectés. Il s'agit également d'une zoonose qui affecte les personnes immunodéprimées.
Il existe de nombreux tests de laboratoire pour le diagnostic de la Leishmaniose, comme l'identification du microorganisme dans la moelle osseuse, le ganglion lymphatique ou la rate, les techniques de PCR ou la détection des anticorps par ELISA ou IFI. Cependant, toutes nécessitent un instrument et un personnel spécialisés. Le test rapide Leishmania Ac est un test sérologique basé sur des protéines recombinantes, qui détecte les anticorps incluant IgG, IgM et IgA dirigés contre le complexe L. donovani (incluant L. infantum). Cela fournit un résultat fiable en seulement 10 minutes sans aucune exigence d'instrumentation.
PRINCIPE
Le dispositif Leishmania Ab Test Rapide est un immunoessai chromatographique à flux latéral. Le dispositif de test comprend :
1) Un tampon de conjugué de couleur bordeaux contenant l'antigène recombinant de L. donovani conjugué à de l'or colloïdal et un conjugué IgG de lapin-or.
2) Une bande de membrane de nitrocellulose contenant une bande pour le résultat positif (bande T) et une bande de contrôle (bande C). La bande T est recouverte d'un conjugué d'antigène de L. donovani, et la bande C est recouverte d'anticorps IgG de chèvre anti-lapin.
Lorsqu'un volume adéquat de sérum à analyser est déposé dans le puits d'échantillon de la cassette de test, l'échantillon migre par action capillaire à travers la cassette. Si des anticorps contre L. donovani sont présents dans l'échantillon, ils se lieront aux conjugués de Leishmania. Le complexe immunologique est capturé sur la membrane par l'antigène qui la recouvre, formant une bande T de couleur bordeaux, ce qui indique un résultat positif et donc un niveau d'anticorps contre L. donovani supérieur au niveau considéré comme positif.
L'absence de la bande T indique un résultat négatif. Le test contient un contrôle interne (bande C) qui doit présenter une bande de couleur bordeaux indépendamment du développement de la couleur sur la bande T. Sinon, le résultat du test n'est pas valide et l'échantillon doit être analysé à nouveau avec un autre dispositif.
CONTENU
Dispositifs individuels pour le test.
Pipettes jetables pour ajouter l'échantillon.
Tampon.
Notice.
PRÉCAUTIONS
-Uniquement pour usage professionnel.
-Ne pas utiliser après la date de péremption indiquée sur l'emballage. Ne pas utiliser le test si son sachet en aluminium est endommagé.
-Ce kit contient des produits d'origine animale. Bien que l'origine des produits soit connue et certifiée, cela ne garantit pas totalement l'absence d'agents pathogènes transmissibles. Il est donc recommandé de traiter ces produits comme potentiellement infectieux et de les manipuler en suivant les précautions de sécurité habituelles (ne pas ingérer ou inhaler).
– Éviter la contamination croisée des échantillons en utilisant un nouveau récipient pour la collecte d'échantillons pour chaque nouvel animal.
– Lire attentivement toute la procédure avant d'effectuer un test.
– Ne pas manger, boire ou fumer dans la zone où les échantillons et les kits sont manipulés. Manipuler tous les échantillons comme s'ils contenaient des agents infectieux. Observer les précautions établies contre les risques microbiologiques pendant les procédures et suivre les procédures standard pour éliminer les déchets.
– Porter des vêtements de protection, tels que des blouses de laboratoire jetables, des gants et une protection oculaire lorsque les échantillons sont analysés.
– La solution saline tamponnée contient de l'azide de sodium qui peut réagir avec le plomb ou le cuivre et former potentiellement des azides métalliques explosifs. Lors de l'élimination de la solution saline tamponnée ou des échantillons extraits, toujours rincer abondamment à l'eau pour éviter la formation d'acides.
– Ne pas échanger ou mélanger les réactifs de différents lots.
– L'humidité et la température peuvent affecter les résultats.
– Les matériaux de test utilisés doivent être éliminés conformément aux réglementations en vigueur.
INSTRUCTIONS DE CONSERVATION
Tous les réactifs sont prêts à l'emploi. Conserver les dispositifs non utilisés et non ouverts entre 2 °C et 30 °C. Les sérums ou sangs doivent être ramenés à température ambiante pendant 10 minutes avant utilisation, ainsi que les dispositifs et le tampon s'ils sont conservés au réfrigérateur. Le dispositif de test est stable jusqu'à la date de péremption imprimée sur le sachet scellé. Ne pas congeler le kit ni exposer le kit à plus de 30 °C.
COLLECTE ET MANIPULATION DES ÉCHANTILLONS
-Le dispositif Leishmania Ab Test Rapide peut être réalisé en utilisant du sang total, du sérum ou du plasma.
– Séparer le sérum ou le plasma du sang dès que possible pour éviter l'hémolyse. Utiliser uniquement des échantillons non hémolysés.
– Le test doit être effectué immédiatement après la collecte des échantillons. Ne pas laisser les échantillons à température ambiante pendant des périodes prolongées. Les échantillons de sérum et de plasma peuvent être conservés à 2-8 °C pendant 3 jours maximum. Pour un stockage à long terme, les échantillons doivent être maintenus en dessous de -20 °C (uniquement sérum ou plasma).
-Le sang total prélevé par ponction veineuse doit être conservé à 2-8 °C si le test doit être effectué dans les deux jours suivant le prélèvement. Ne pas congeler les échantillons de sang total.
-Amener les échantillons à température ambiante avant le test. Les échantillons congelés doivent être complètement décongelés et homogénéisés avant le test. Les échantillons ne doivent pas être congelés et décongelés à plusieurs reprises.
– Si les échantillons doivent être transportés, ils doivent être emballés conformément aux réglementations locales concernant le transport d'agents biologiques.
PROCÉDURE DE TEST
1) Amener les échantillons, le tampon et les dispositifs à température ambiante s'ils sont réfrigérés ou congelés. Placer le dispositif sur une surface plane et propre.
2)
Pour le sang total
Dispenser 1 goutte de sang total (environ 40-50 uL) dans le puits d'échantillon. Ensuite, ajouter 2 gouttes (environ 80 uL) du tampon immédiatement.
Pour le sérum ou le plasma
Dispenser 1 goutte (environ 40 uL) de l'échantillon dans le puits d'échantillon, en s'assurant qu'il n'y a pas de bulles d'air. Ensuite, ajouter 1 goutte (environ 40 uL) du diluant d'échantillon immédiatement.
3) Les résultats peuvent être lus en 15 minutes. Les résultats positifs peuvent être visibles à partir de 1 minute. Ne pas lire le résultat après 30 minutes.
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INTERPRÉTATION DU RÉSULTAT
RÉSULTAT POSITIF :
Une bande rouge apparaît dans la région de contrôle (C) et une autre bande colorée apparaît dans la région de la bande T.

RÉSULTAT NÉGATIF : Une bande colorée apparaît dans la région de contrôle (C). Aucune bande n'est observée dans la région de la bande de test (T).

RÉSULTAT NON VALIDE :La bande de contrôle n'apparaît pas dans le délai de 15 minutes. Veuillez vérifier la procédure et répéter avec un nouveau test. Si le problème persiste, cessez d'utiliser le kit et contactez votre distributeur local.
* REMARQUE : Les échantillons avec des résultats positifs doivent être confirmés par une méthode alternative et doivent également présenter des signes cliniques et/ou des altérations hématobiochimiques. Les animaux présentant des signes cliniques et un résultat négatif doivent également être confirmés. Le test de confirmation est réalisé gratuitement au Laboratoire Dr. Barba.
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CONTRÔLE DE QUALITÉ
Des contrôles de qualité sont à votre disposition, disponibles sur commande.
EFFICACITÉ DU TEST
La sensibilité relative au test ELISA est de 91,2 % et la spécificité de 99,5 %, avec une concordance de 98,3 %.
LIMITES DU TEST
1) La procédure de test et l'interprétation des résultats doivent être strictement respectées. Le non-respect de la procédure peut donner des résultats inexacts.
2) Le test Leishmania Ab Test Rapide se limite à la détection qualitative des anticorps contre
L. donovani dans le sang, le sérum ou le plasma. L'intensité de la bande de test n'a pas de corrélation linéaire avec le titre d'anticorps dans l'échantillon.
3) Un résultat négatif pour un sujet individuel indique l'absence d'anticorps anti-L. donovani
au-dessus du seuil de coupure. Cependant, un résultat négatif n'exclut pas la possibilité d'une exposition à L. donovani.
4) Un résultat négatif peut se produire si la quantité d'anticorps présents contre L. donovani est inférieure aux limites de détection du test, ou si les anticorps ne sont pas présents au stade de la maladie où l'échantillon est prélevé.
5) Certains échantillons contenant des titres élevés d'anticorps hétérophiles ou de facteur rhumatoïde peuvent affecter les résultats attendus.
6) Les résultats obtenus avec ce test ne doivent être interprétés qu'en conjonction avec d'autres procédures diagnostiques et constatations cliniques.
RÉFÉRENCES
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