Tests Histologiques

L’envoi de spécimens biologiques doit respecter les protocoles établis par le service de messagerie ou de transport utilisé. Dans certains cas, le transport aérien exige le respect de la réglementation de l’Association internationale du transport aérien (IATA) relative aux matières dangereuses.

Les tissus destinés à l’examen microscopique prélevés par biopsie ou lors de la nécropsie peuvent être essentiels pour obtenir un diagnostic. L’immunohistochimie (IHC) et d’autres tests avancés pouvant être appliqués aux tissus fixés au formol renforcent encore l’utilité de l’évaluation histologique comme technique de diagnostic.

Les tissus autolysés sont généralement inutiles pour l’évaluation histologique ; une nécropsie rapide et le prélèvement d’organes sont essentiels.

Les tissus ne doivent pas être congelés avant la fixation.

À l’exception des tissus du SNC, les échantillons prélevés pour l’évaluation histologique ne doivent jamais dépasser 1 cm d’épaisseur (de préférence 5-7 mm) et doivent être placés immédiatement dans un volume ≥ 10 fois supérieur de formol à 10 % tamponné au phosphate afin de garantir une fixation adéquate.

Les tissus doivent être représentatifs de toute lésion présente et, dans le cas des biopsies cutanées à l’emporte-pièce et des biopsies obtenues par prélèvement endoscopique, être centrés directement sur les lésions macroscopiquement visibles.
Les biopsies en coin ou les échantillons de tissus prélevés lors de la nécropsie doivent inclure une partie du tissu environnant apparemment normal ; l’interface entre le tissu normal et anormal peut fournir des informations clés.

Les biopsies par excision de petites tumeurs (< 1,5 cm) peuvent être coupées en deux. Les tumeurs plus volumineuses peuvent être coupées en tranches comme du pain afin que le formol puisse pénétrer jusqu’à la face de chaque tranche. Alternativement, plusieurs échantillons représentatifs peuvent être prélevés (de 7 mm de large, y compris l’interface entre le normal et l’anormal).

Au lieu d’envoyer de grands volumes de formol, les échantillons de tissus peuvent être fixés en interne pendant au moins 24 heures dans un volume adéquat, puis transférés dans un volume plus faible de formol frais pour l’envoi.

La présentation de tissus conservés dans le formol est acceptable à tout moment, bien que la qualité de l’échantillon se dégrade avec le temps. Une fixation prolongée dans le formol peut nuire aux tests avancés ; par exemple, il n’est pas recommandé de réaliser des tests immunohistochimiques sur des tissus ayant été conservés dans le formol pendant plus de 7 semaines, car les résultats pourraient ne pas être valides.

Les échantillons doivent être envoyés dans des récipients incassables approuvés par le laboratoire, munis de bouchons à vis et emballés de manière à éviter tout déversement ou congélation pendant l’envoi (voir Emballage des échantillons pour l’envoi).

 

Les tissus spécifiques prélevés lors de la nécropsie nécessitent une attention particulière :

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• Comme la muqueuse gastro-intestinale se décompose rapidement, les courtes sections d’intestin prélevées lors de la nécropsie doivent être ouvertes longitudinalement pour permettre une fixation adéquate.

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• Si la moelle épinière est présentée, une incision longitudinale prudente doit être pratiquée dans la dure-mère pour permettre une pénétration plus rapide dans la moelle.

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• La fixation de l’encéphale pose un dilemme particulier, surtout si la localisation neuroanatomique des lésions au sein de l’organe n’a pas pu être déterminée antemortem.
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  • Idéalement, un cerveau entier, intact et fixé est nécessaire pour une évaluation histologique complète.

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  • L’immersion du cerveau pendant de nombreux jours dans un grand volume de formaline est nécessaire pour une fixation adéquate ; par conséquent, les cerveaux sont normalement transportés dans un état seulement partiellement fixé. Si le spécimen peut être envoyé d’un jour à l’autre, il peut être acceptable d’envoyer un cerveau réfrigéré, soigneusement emballé et non fixé, qui pourra ensuite être traité au laboratoire de diagnostic.

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  • Souvent, le cerveau est divisé longitudinalement en deux et une moitié est envoyée non fixée (fraîche), correctement réfrigérée, pour des tests microbiologiques, tandis que l’autre moitié est partiellement fixée pendant le transport. Cette méthode peut s’avérer insatisfaisante s’il s’agit d’une lésion unilatérale solitaire. Le découpage de l’encéphale en portions adaptées à une fixation rapide introduit des artefacts de fixation considérables et doit être évité autant que possible ; il est préférable de fixer l’encéphale intact (ou divisé en deux) dans un grand volume de formol pendant > 24 heures.