Testes Histológicos

O envio de espécimes biológicos deve cumprir os protocolos estabelecidos pelo serviço de mensageiro ou transporte utilizado. Em alguns casos, o transporte aéreo exige o cumprimento da regulamentação da Associação Internacional de Transporte Aéreo (IATA) para materiais perigosos.

Os tecidos para exame microscópico recolhidos por biópsia ou durante a necropsia podem ser fundamentais para obter um diagnóstico. A imuno-histoquímica (IHC) e outros testes avançados que podem ser aplicados a tecidos fixados em formol reforçam ainda mais a utilidade da avaliação histológica como técnica de diagnóstico.

Os tecidos autolisados são geralmente inúteis para a avaliação histológica; a necropsia rápida e a colheita de amostras de órgãos são fundamentais.

Os tecidos não devem ser congelados antes da fixação.

À exceção dos tecidos do SNC, as amostras recolhidas para avaliação histológica nunca devem ter mais de 1 cm de espessura (de preferência 5-7 mm) e devem ser colocadas imediatamente em ≥ 10 vezes o seu volume de formol a 10% tamponado com fosfato para garantir uma fixação adequada.

Os tecidos devem ser representativos de qualquer lesão presente e, no caso das biópsias cutâneas por punch e das biópsias obtidas por colheita endoscópica, estar centrados diretamente nas lesões macroscopicamente visíveis.
As biópsias em cunha ou as amostras de tecido recolhidas na necropsia devem incluir parte do tecido circundante aparentemente normal; a interface entre o tecido normal e o anormal pode fornecer informações essenciais.

As biópsias por excisão de tumores pequenos (< 1,5 cm) podem ser cortadas ao meio. Os tumores maiores podem ser cortados em fatias como pão para que o formol possa penetrar até à face de cada fatia. Em alternativa, podem recolher-se várias amostras representativas (com 7 mm de largura, incluindo a interface entre o normal e o anormal).

Em vez de enviar grandes volumes de formol, as amostras de tecido podem ser fixadas internamente durante pelo menos 24 horas num volume adequado e depois transferidas para um volume menor de formol fresco para envio.

A apresentação de tecido armazenado em formol é aceitável em qualquer altura, embora a qualidade da amostra se degrade com o tempo. A fixação prolongada em formol pode afetar negativamente os testes avançados; por exemplo, não se recomenda realizar testes imuno-histoquímicos com tecidos que tenham estado armazenados em formol durante mais de 7 semanas, uma vez que os resultados podem não ser válidos.

As amostras devem ser enviadas em recipientes inquebráveis aprovados pelo laboratório, com tampas de rosca, e embaladas de modo a evitar o seu derrame ou congelamento durante o envio (ver Embalagem de amostras para envio).

Os tecidos específicos recolhidos na necropsia requerem atenção adicional:

Uma vez que a mucosa gastrointestinal se decompõe rapidamente, as secções curtas de intestino recolhidas na necropsia devem ser abertas longitudinalmente para permitir uma fixação adequada.

Se a medula espinal for apresentada, deve ser praticada uma incisão longitudinal cuidadosa na dura-máter para permitir uma penetração mais rápida na medula.

A fixação do encéfalo coloca um dilema especial, sobretudo se não foi possível determinar antemortem a localização neuroanatómica das lesões dentro do órgão.
- Idealmente, é necessário um cérebro inteiro, intacto e fixado para uma avaliação histológica completa.
- A imersão do cérebro durante muitos dias num grande volume de formalina é necessária para uma fixação adequada; por conseguinte, os cérebros são normalmente transportados num estado apenas parcialmente fixado. Se o espécime puder ser enviado de um dia para o outro, pode ser aceitável enviar um cérebro refrigerado, cuidadosamente embalado e não fixado, que pode depois ser processado no laboratório de diagnóstico.
- Frequentemente, o cérebro é dividido longitudinalmente ao meio e uma metade é enviada não fixada (fresca), devidamente refrigerada, para realizar testes microbiológicos, enquanto a outra metade é fixada parcialmente durante o transporte. Este método pode revelar-se insatisfatório se se tratar de uma lesão unilateral solitária. Cortar o encéfalo em porções adequadas para uma fixação rápida introduz consideráveis artefactos de fixação e deve ser evitado tanto quanto possível; é preferível fixar o encéfalo intacto (ou dividido ao meio) num grande volume de formol durante > 24 horas.