Testes citológicos
O envio de espécimes biológicos deve cumprir os protocolos estabelecidos pelo serviço de mensageira ou transporte utilizado. Em alguns casos, o transporte aéreo exige o cumprimento da regulamentação da Associação Internacional de Transporte Aéreo (IATA) para materiais perigosos.
No caso de efeitos de massa superficiais, a colheita de amostras com agulha fina (ou seja, aspiração ou técnica de extração de núcleos/«pica-pau») costuma ter um maior rendimento diagnóstico e ser mais representativa da lesão primária do que as amostras obtidas por impressão superficial. Os esfregaços de impressão são propensos à contaminação com detritos e flora da pele ou do ambiente, ou podem representar apenas uma inflamação ou infeção secundária.
O material aspirado deve ser espalhado em monocamada (ou seja, aproximadamente metade das células tocam-se mas não se sobrepõem) após a aplicação na lâmina (Imagens de linfócitos 1 e células mesenquimais 2)
O método de espalhamento preferido consiste num espalhamento horizontal suave utilizando uma segunda lâmina colocada sobre o material depois de o depositar na lâmina inferior (ver imagem 3, preparação ótima). Esta técnica é superior à técnica pull-apart vertical (ver imagem 4, preparação pull-apart).
A densidade excessiva das amostras e a citólise inibem a capacidade de avaliar adequadamente as células nas amostras citológicas (ver as lâminas Densidade excessiva das amostras com ampliação baixa 5 e ampliação alta 6; ver também a lâmina Citólise excessiva (lise celular) 7 ). Apenas as células intactas podem ser avaliadas citologicamente, porque a citólise introduz artefactos que podem simular malignidade, como o aumento dos núcleos e o aumento da proeminência dos nucléolos.
Tanto a técnica pull-apart como a falta de esforço para espalhar o material (ou seja, a simples secagem ao ar de material biológico depositado em forma de gota) são propensas a uma densidade excessiva da amostra e à citólise, e podem não ser diagnósticas (ver amostra densa sem espalhamento na lâmina 8).
As amostras com componente fluídica podem ser espalhadas da mesma forma que os esfregaços sanguíneos. Os fluidos muito celulares podem ser espalhados diretamente; os fluidos de baixa celularidade devem ser centrifugados para concentrar as células.
As lâminas devem ser conservadas à temperatura ambiente e protegidas do pó, bem como da humidade excessiva e da exposição prolongada à luz. É importante etiquetar fisicamente as lâminas com a identificação do paciente, bem como a proveniência da amostra citológica; etiquetar apenas as caixas ou cartões das lâminas não é fiável, porque as lâminas podem separar-se dos recipientes ou estes podem ser reutilizados.
As amostras que contêm um excesso de ultrassons ou gel lubrificante podem não ser diagnósticas, uma vez que este material é opaco ao microscópio e oculta as células, além de provocar uma má captação da coloração celular.
Outras considerações práticas para a preparação de amostras citológicas são utilizar sempre lâminas frescas, evitar o uso de lamélulas e fita de acetato, e assegurar que o material celular é depositado para o centro de uma só face da lâmina (ver a amostra em ambos os lados da lâmina 9).
À medida que a digitalização de lâminas se generaliza nos laboratórios de diagnóstico, não é possível que um patologista simplesmente vire a lâmina no seu microscópio para focar o material da lâmina oposta. Além disso, se o material de ambos os lados se sobrepuser, o efeito líquido pode ser um material demasiado espesso para ser avaliado adequadamente
A exposição de esfregaços sanguíneos e citológicos à formalina ou a vapores de formalina (incluindo a proximidade de frascos selados de formalina) interferirá com a coloração e a avaliação adequadas, o que pode dar origem a uma amostra não diagnóstica. Estas preparações em lâminas nunca devem ser enviadas para o laboratório no mesmo pacote que os tecidos fixados com formol.
Os esfregaços não fixados e secos ao ar são geralmente adequados para a coloração imunocitoquímica (ICC); no entanto, em alguns casos, recomenda-se enviar as amostras em tubos que contenham meios de transporte. Se estiverem previstas colorações especiais, incluindo a CCI, deve contactar-se o laboratório antes do envio para garantir que é seguido o protocolo específico do seu laboratório.