Perguntas frequentes
Que amostras são adequadas para realizar com PCR?
O material de amostra para PCR depende do patógeno que se queira detetar e da presença ou não de sintomas. Dependendo da disseminação e distribuição do patógeno no corpo, bem como da sua eliminação, são adequados diferentes tipos de amostras.
Os patógenos que causam viremia, parasitemia ou bacteriemia podem ser detetados diretamente numa amostra de sangue EDTA nesta fase da infeção. A heparina de lítio como anticoagulante é menos adequada, uma vez que pode inibir a PCR. Para amostras de sangue, bem como para outros líquidos, é necessária uma quantidade de pelo menos 0,2 ml.
Ao contrário do exame bacteriológico/micológico, recomendam-se zaragatoas estéreis sem meio de transporte para os exames de PCR. Isto porque, se houver uma baixa concentração de patógenos, podem ocorrer resultados falsos negativos em amostras enviadas com meio. As zaragatoas podem ser humedecidas com solução salina fisiológica para recolher as amostras. Também são adequados para os exames de PCR os chamados citobrushs (zaragatoas de escova), que podem ser enviados num tubo estéril sem revestimento.
Para a deteção de patógenos nas fezes, são necessárias quantidades de amostra aproximadamente do tamanho de uma avelã. Para alguns patógenos (por exemplo, coronavírus, Tritrichomonas foetus) recomendamos recolher amostras durante 3 dias, uma vez que estes patógenos são excretados de forma intermitente com as fezes.
Outros materiais de amostra como biópsias de pele, órgãos, urina, líquido sinovial, líquido cefalorraquidiano, medula óssea e linfonodos devem ser preferencialmente enviados em recipientes de amostra estéreis e sem aditivos, para realizar exames de PCR. As soluções de fixação como a formalina ou similares podem conduzir à degradação do ADN, à inibição da PCR e, portanto, a resultados falsos negativos.
Como devo identificar as amostras para enviar ao laboratório?
- Cole um dos autocolantes que lhe teremos enviado no saco onde irá a amostra.
- Introduza a amostra no saco com o nome do animal.
- O saco deverá conter a amostra de um único animal.
Como faço a gestão do envio da amostra para o laboratório?
Encarregamo-nos de recolher a amostra no endereço que nos indicar. Depois de recolher a amostra, contacte-nos para que a vamos buscar; a forma mais eficaz é através de uma chamada.. A amostra chegará ao nosso laboratório no dia seguinte ao pedido.
É necessário enviar as amostras refrigeradas?
Não é necessário enviar as amostras refrigeradas. Até ao momento de serem enviadas, podem ser guardadas no frigorífico a 2-8°C. Deve evitar-se ao máximo refrigerar e deixar as amostras atingir a temperatura ambiente.
Como realizar corretamente um esfregaço bucal?
Na recolha da amostra deve esfregar-se firmemente com a zaragatoa na mucosa oral (entre a gengiva e as laterais da boca), para assegurar que se adiram células suficientes à zaragatoa. Não é possível realizar um teste genético se não se recolher material genético suficiente
Quanto tempo pode passar desde que se recolhe uma amostra até que é enviada?
As amostras devem ser enviadas ao laboratório o mais cedo possível, pelo que é importante que sejam enviadas no mesmo dia da recolha.
Que material é adequado para o estudo genético de doenças hereditárias?
Para realizar um teste por PCR, o ADN do animal é sempre a base. Uma amostra de sangue EDTA (0,5 – 1 ml) é a mais adequada para purificar o ADN, uma vez que existe uma grande quantidade de material celular do animal.
Também é possível a utilização de dois esfregaços da mucosa (ou um e-swab). Para isso deve realizar-se um esfregaço bucal, esfregando vigorosamente uma zaragatoa de algodão estéril no interior da bochecha do animal. A zaragatoa deve depois secar para evitar a formação de bolor e ser enviada num tubo sem meio (sem líquidos nem ágar).
Quando utilizar zaragatoas, assegure-se de que o animal não comeu durante 1-2 horas antes e não teve contacto com outros animais para evitar possíveis contaminações, uma vez que isso poderia afetar o resultado do teste.