Test rapido Leishmania Ac

Questo test è un immunoassay per la rilevazione qualitativa di anticorpi che includono IgG, IgM e IgA contro le specie che compongono il complesso Leishmania donovani (incluso Leishmania infantum, agente causale della Leishmaniosi canina), in siero o plasma. Questo test è destinato a essere utilizzato come test di screening e come aiuto nella diagnosi della Leishmaniosi canina. Qualsiasi campione positivo con questo test dovrebbe essere confermato con un test alternativo (disponibile gratuitamente presso il nostro laboratorio).
La Leishmaniosi è un'infezione diffusa dalla zanzara Phlebotomus, che acquisisce l'infezione nutrendosi di animali infetti. Si tratta anche di una zoonosi che colpisce persone immunodepresse.
Esistono numerosi test di laboratorio per la diagnosi della Leishmaniosi, come l'identificazione del microrganismo nel midollo osseo, nei linfonodi o nella milza, le tecniche di PCR o la rilevazione di anticorpi tramite ELISA o IFI. Tuttavia, tutte richiedono strumentazione e personale specializzati. Il test rapido Leishmania Ac è un test sierologico basato su proteine ricombinanti, che rileva anticorpi che includono IgG, IgM e IgA contro il complesso L. donovani (incluso L. infantum). Questo fornisce un risultato affidabile in soli 10 minuti senza alcun requisito di strumentazione.
PRINCIPIO
Il dispositivo Leishmania Ab Test Rapido è un immunoassay cromatografico a flusso laterale. Il dispositivo di test consiste in:
1) Un tampone di coniugato color bordeaux che contiene l'antigene ricombinante di L. donovani coniugato con oro colloidale e un coniugato di IgG di coniglio-oro.
2) Una striscia di membrana di nitrocellulosa che contiene una banda per il risultato positivo (banda T) e una banda di controllo (banda C). La banda T è rivestita con un coniugato di antigene di L. donovani, e la banda C è rivestita con anticorpo IgG di capra anti-coniglio.
Quando un volume adeguato di siero da analizzare viene dispensato nel pozzetto del campione della cassetta di test, il campione migra per azione capillare attraverso la cassetta. Se sono presenti anticorpi contro L. donovani nel campione, si legheranno ai coniugati di Leishmania. Il complesso immunologico viene catturato sulla membrana dall'antigene che la riveste, formando una banda T color bordeaux, che indica che il risultato è positivo e quindi esiste un livello di anticorpi contro L. donovani superiore al livello considerato positivo.
L'assenza della banda T indica un risultato negativo. Il test contiene un controllo interno (banda C) che deve mostrare una banda color bordeaux indipendentemente dallo sviluppo del colore nella banda T. In caso contrario, il risultato del test non è valido e il campione deve essere analizzato nuovamente con un altro dispositivo.
CONTENUTO
Dispositivi individuali per il test.
Pipette monouso per aggiungere il campione.
Tampone.
Foglietto illustrativo.
PRECAUZIONI
-Solo per uso professionale.
-Non utilizzare dopo la data di scadenza indicata sulla confezione. Non utilizzare il test se la busta di alluminio è danneggiata.
-Questo kit contiene prodotti di origine animale. Sebbene l'origine dei prodotti sia nota e certificata, ciò non garantisce totalmente l'assenza di agenti patogeni trasmissibili. Si raccomanda pertanto di trattare questi prodotti come potenzialmente infettivi e di maneggiarli seguendo le precauzioni di sicurezza abituali (non ingerire o inalare).
– Evitare la contaminazione incrociata dei campioni utilizzando un nuovo contenitore per la raccolta dei campioni per ogni nuovo animale.
– Leggere attentamente l'intera procedura prima di eseguire qualsiasi test.
– Non mangiare, bere o fumare nell'area in cui vengono maneggiati campioni e kit. Maneggiare tutti i campioni come se contenessero agenti infettivi. Osservare le precauzioni stabilite contro i rischi microbiologici durante le procedure e seguire le procedure standard per lo smaltimento dei rifiuti.
– Indossare indumenti protettivi, come camici da laboratorio monouso, guanti e protezione per gli occhi quando i campioni vengono analizzati.
– La soluzione salina tamponata contiene sodio azide che può reagire con piombo o rame e formare potenzialmente azidi metalliche esplosive. Quando si smaltisce la soluzione salina tamponata o i campioni estratti, risciacquare sempre abbondantemente con acqua per evitare la formazione di acidi.
– Non scambiare o mescolare reagenti di lotti diversi.
– L'umidità e la temperatura possono influenzare i risultati.
– I materiali di test utilizzati devono essere smaltiti secondo le normative vigenti.
ISTRUZIONI DI CONSERVAZIONE
Tutti i reagenti sono pronti all'uso. Conservare i dispositivi non utilizzati e non aperti tra 2 °C e 30 °C. I sieri o i campioni di sangue devono essere portati a temperatura ambiente per 10 minuti prima dell'uso, così come i dispositivi e il tampone se conservati in frigorifero. Il dispositivo di test è stabile fino alla data di scadenza stampata sulla busta sigillata. Non congelare il kit né esporre il kit a temperature superiori a 30 °C.
RACCOLTA E MANIPOLAZIONE DEI CAMPIONI
-Il dispositivo Leishmania Ab Test Rapido può essere eseguito utilizzando sangue intero, siero o plasma.
– Separare il siero o il plasma dal sangue il prima possibile per evitare l'emolisi. Utilizzare solo campioni non emolizzati.
– Il test deve essere eseguito immediatamente dopo la raccolta dei campioni. Non lasciare i campioni a temperatura ambiente per periodi prolungati. I campioni di siero e plasma possono essere conservati a 2-8 °C per un massimo di 3 giorni. Per la conservazione a lungo termine, i campioni devono essere mantenuti al di sotto di -20 °C (solo siero o plasma).
-Il sangue intero prelevato per puntura venosa deve essere conservato a 2-8 °C se il test deve essere eseguito entro due giorni dal prelievo. Non congelare campioni di sangue intero.
-Portare i campioni a temperatura ambiente prima del test. I campioni congelati devono essere completamente scongelati e omogeneizzati prima del test. I campioni non devono essere congelati e scongelati ripetutamente.
– Se i campioni devono essere trasportati, devono essere imballati rispettando le normative locali relative al trasporto di agenti biologici.
PROCEDURA DEL TEST
1) Portare campioni, tampone e dispositivi a temperatura ambiente se refrigerati o congelati. Posizionare il dispositivo su una superficie pulita e piana.
2)
Per sangue intero
Dispensare 1 goccia di sangue intero (circa 40-50 uL) nel pozzetto del campione. Quindi, aggiungere immediatamente 2 gocce (circa 80 uL) del tampone.
Per siero o plasma
Dispensare 1 goccia (circa 40 uL) del campione nel pozzetto del campione, assicurandosi che non ci siano bolle d'aria. Quindi aggiungere immediatamente 1 goccia (circa 40 uL) del diluente del campione.
3) I risultati possono essere letti in 15 minuti. I risultati positivi possono essere visibili da 1 minuto. Non leggere il risultato dopo 30 minuti.
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INTERPRETAZIONE DEL RISULTATO
RISULTATO POSITIVO:
Una banda rossa appare nella regione di controllo (C) e un'altra banda colorata appare nella regione della banda T.

RISULTATO NEGATIVO: Una banda colorata appare nella regione di controllo (C). Non si osserva alcuna banda nella regione della banda di test (T).

RISULTATO NON VALIDO:La banda di controllo non appare entro il periodo di 15 minuti. Si prega di rivedere la procedura e ripetere con un nuovo test. Se il problema persiste, interrompere l'uso del kit e contattare il distributore locale.
* NOTA: I campioni con risultati positivi devono essere confermati con un metodo alternativo e devono inoltre essere presenti segni clinici e/o alterazioni ematobiochimiche. Gli animali con segni clinici e risultato negativo devono essere ugualmente confermati. Il test di conferma viene eseguito gratuitamente presso il Laboratorio Dr. Barba.
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CONTROLLO QUALITÀ
Sono disponibili controlli di qualità, fornibili su richiesta.
EFFICACIA DEL TEST
La sensibilità relativa al test ELISA è del 91,2% e la specificità del 99,5%, con una concordanza del 98,3%.
LIMITAZIONI DEL TEST
1) La procedura del test e l'interpretazione dei risultati devono essere seguite rigorosamente. La mancata osservanza della procedura può produrre risultati inaccurati.
2) Il test rapido Leishmania Ab è limitato alla rilevazione qualitativa degli anticorpi per
L. donovani in sangue, siero o plasma. L'intensità della banda del test non ha una correlazione lineare con il titolo anticorpale del campione.
3) Un risultato negativo per un singolo soggetto indica l'assenza di anticorpi anti-L. donovani
al di sopra della soglia di cut-off. Tuttavia, un risultato negativo non esclude la possibilità di esposizione a L. donovani.
4) Un risultato negativo può verificarsi se la quantità di anticorpi presenti contro L. donovani è al di sotto dei limiti di rilevazione del test, o se gli anticorpi non sono presenti nello stadio della malattia in cui viene raccolto il campione.
5) Alcuni campioni contenenti titoli elevati di anticorpi eterofili o fattore reumatoide possono influenzare i risultati attesi.
6) I risultati ottenuti con questo test devono essere interpretati solo in combinazione con altre procedure diagnostiche e riscontri clinici.
RIFERIMENTI
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