Domande frequenti

Il materiale campione per la PCR dipende dal patogeno da rilevare e dalla presenza o meno di sintomi. A seconda della diffusione e distribuzione del patogeno nell’organismo nonché della sua eliminazione, sono adatti diversi tipi di campioni.

I patogeni che causano viremia, parassitemia o batteriemia possono essere rilevati direttamente in un campione di sangue EDTA in questa fase dell’infezione. L’eparina di litio come anticoagulante è meno adatta, poiché può inibire la PCR. Per i campioni di sangue, così come per altri liquidi, è necessaria una quantità di almeno 0,2 ml.

A differenza dell’esame batteriologico/micologico, per gli esami PCR si raccomandano tamponi sterili senza terreno di trasporto. Questo perché in presenza di una bassa concentrazione di patogeni, i campioni inviati con terreno possono dare risultati falsi negativi. I tamponi possono essere inumiditi con soluzione fisiologica per prelevare i campioni. Anche i cosiddetti citobrush (tamponi a spazzola), che possono essere inviati in una provetta sterile senza rivestimento, sono adatti agli esami PCR.

Per il rilevamento dei patogeni nelle feci sono necessarie quantità di campione di circa le dimensioni di una nocciola. Per alcuni patogeni (ad esempio, coronavirus, Tritrichomonas foetus) consigliamo di raccogliere campioni per 3 giorni, poiché questi patogeni vengono eliminati in modo intermittente con le feci.

Altri materiali campione come biopsie cutanee, organi, urine, liquido sinoviale, liquido cefalorachidiano, midollo osseo e linfonodi vanno preferibilmente inviati in contenitori per campioni sterili e senza additivi, per eseguire esami PCR. Le soluzioni di fissaggio come la formalina o simili possono portare alla degradazione del DNA, all’inibizione della PCR e quindi a risultati falsi negativi.

• Attaccate uno degli adesivi che vi avremo inviato sulla busta che conterrà il campione.
• Inserite il campione nella busta con il nome dell’animale.
• La busta deve contenere il campione di un solo animale.

Ci occupiamo noi di ritirare il campione all’indirizzo che ci indicate. Una volta prelevato il campione, contattateci per far sì che veniamo a prenderlo; il modo più efficace è tramite una telefonata.. Il campione arriverà nel nostro laboratorio il giorno successivo alla richiesta.

Non è necessario inviare i campioni refrigerati. Fino al momento dell’invio, possono essere conservati in frigorifero a 2-8°C. Si deve evitare il più possibile di refrigerare e riportare a temperatura ambiente i campioni.

Al momento del prelievo si deve strofinare energicamente il tampone sulla mucosa orale (tra la gengiva e i lati della bocca), per garantire che un numero sufficiente di cellule aderisca al tampone. Non è possibile eseguire un test genetico se non viene raccolto materiale genetico a sufficienza

I campioni devono essere inviati al laboratorio il prima possibile, per cui è importante spedirli lo stesso giorno del prelievo.

Per eseguire un test tramite PCR, il DNA dell’animale è sempre la base. Un campione di sangue EDTA (0,5 – 1 ml) è il più adatto per purificare il DNA, poiché contiene una grande quantità di materiale cellulare dell’animale.

È anche possibile l’uso di due tamponi della mucosa (o un e-swab). A tal fine si deve eseguire un tampone buccale, strofinando vigorosamente un tampone di cotone sterile all’interno della guancia dell’animale. Il tampone deve poi essere asciugato per evitare la formazione di muffa e inviato in una provetta senza terreno (senza liquidi né agar).

Quando utilizzate i tamponi, assicuratevi che l’animale non abbia mangiato per 1-2 ore prima e non sia entrato in contatto con altri animali per evitare possibili contaminazioni, poiché ciò potrebbe influire sul risultato del test.