Test di analisi biochimica del siero
L’invio di campioni biologici deve rispettare i protocolli stabiliti dal servizio di corriere o trasporto utilizzato. In alcuni casi, il trasporto aereo richiede il rispetto della normativa dell’Associazione Internazionale del Trasporto Aereo (IATA) per i materiali pericolosi.
Gli anticoagulanti presenti nel plasma possono determinare un aumento o una diminuzione dei valori degli analiti del test (ad esempio, i campioni contaminati con potassio-EDTA presentano concentrazioni di potassio artificialmente elevate e concentrazioni di calcio ridotte); pertanto, per impostazione predefinita, deve essere presentato il siero.
Tuttavia, in alcuni casi, il plasma eparinizzato può essere accettabile o, eventualmente, necessario. Si raccomanda di consultare il laboratorio prima di prelevare il campione per qualsiasi test o specie non di routine.
Poiché la lipemia può interferire con una serie di test chimici per cani e gatti, si consiglia il digiuno per 12 ore prima del prelievo del campione, a meno che non esista una potenziale controindicazione medica, come nel caso di pazienti pediatrici o razze di cani toy.
Per i campioni di siero, il sangue deve essere prelevato in una provetta per siero (tappo rosso) o in una provetta separatrice di siero (tappo tigrato). Il campione deve essere mantenuto a temperatura ambiente per 20-30 minuti per consentire la completa formazione del coagulo e la sua retrazione. Una formazione incompleta del coagulo può far gelificare il siero a causa della formazione latente di fibrina.
Il coagulo deve essere separato dal vetro bordando delicatamente le pareti della provetta con un bastoncino applicatore per allentare il coagulo. Successivamente, il campione deve essere centrifugato a velocità moderata (~450 rpm) per 10 minuti.
Se il campione è stato raccolto in una provetta separatrice di siero, la centrifugazione farà depositare uno strato di gel polimerico tra le cellule sedimentate e il siero. Lo strato di gel deve essere ispezionato per garantire l’integrità della barriera e si raccomanda di ripetere la centrifugazione se è presente una crepa visibile in questo strato.
Se è stata utilizzata una provetta per siero (red-top), il siero deve essere rimosso e trasferito in una provetta pulita per ridurre al minimo gli artefatti (ad es., la glicolisi nella componente cellulare del campione di sangue può determinare una diminuzione artificiale della concentrazione di glucosio). Il siero deve essere refrigerato o congelato fino all’analisi. I ritardi nell’analisi possono influire negativamente sui risultati di diversi analiti.
Una manipolazione brusca del campione o una separazione incompleta degli eritrociti dal siero possono favorire l’emolisi, che può interferire con alcuni test. Per i pannelli chimici, di norma si preferiscono 0,5 mL di siero, sebbene i requisiti minimi del laboratorio possano variare e debbano essere consultati per volumi di siero < 0,5 mL.