Pregunta: ¿Interfiere la hemólisis en los resultados?

Respuesta: Depende de las pruebas y del grado de hemólisis. Las pruebas más sensibles a la hemólisis son fósforo, AST, ALT, proteínas totales, albúmina, amilasa, CPK y LDH, aunque un grado grande de hemólisis interfiere en todas las pruebas.

P.: Tengo problemas frecuentes de hemólisis en los sueros ¿Qué solución puede haber?

R.: En casos puntuales no es raro que pueda hemolizarse un suero. Pero si sucede con frecuencia es muy probable que haya algún problema en el manejo de la muestra. Los más frecuentes son: <br>-Extracciones difíciles. <br>-Uso de agujas de calibre muy pequeño, especialmente si se hace con jeringuillas muy grandes.<br>-No se retira la aguja antes de pasar la sangre al tubo.<br>-Se espera demasiado a centrifugar la muestra. Si se utiliza tubo con heparina debe centrifugarse de inmediato. Si se usa suero con aditivo no debe esperarse más de dos horas.<br>-El acumulador de frío no está congelado cuando se introduce en la caja de transporte. Este problema se manifiesta sólo en verano.

Pregunta: ¿Cuánto tiempo se puede conservar una orina para cultivo?

Respuesta: En refrigeración lo ideal es que no transcurran más de 24 horas. Pasado ese tiempo aumenta la probabilidad de que obtengamos resultados falsamente positivos por contaminación, especialmente en casos de resultados de bajos crecimientos bacterianos (por debajo de 100.000 UFC/ml)

P.: ¿Existe interferencia entre la vacunación de leishmaniosis y el nivel de anticuerpos?

R.: Los datos preliminares indican que aproximadamente uno de cada cinco animales desarrolla a raíz de la vacunación una tasa detectable de anticuerpos, por lo que en estos casos las dos únicas forma de discriminar si un animal con un nivel detectable de anticuerpos está o no enfermo de leishmaniosis es mediante la realización de un PCR de leishmania o la prueba de anticuerpos no vacunales. El test PCR se debe realizar siempre al menos un mes después de la vacunación, para evitar falsos positivos.

P.: ¿Puede un perro con parvovirosis dar negativo en el test rápido?

R.: Es relativamente habitual, especialmente en los casos de más de 48 horas de evolución, debido presumiblemente a la formación de complejos antígeno-anticuerpo que impiden la detección del virus por parte de los tests rápidos. <br>En estos casos se recomienda realizar la prueba de PCR.

P.: ¿Cómo se trata una infección intestinal por clostridios?

R.: Los antibióticos de elección son metronidazol o vancomicina por vía oral. Sin embargo, si no se complemente con un tratamiento al menos un mes con prebióticos (una dieta rica en fibra) y probióticos lo normal es que haya recidivas.

P.: ¿Cómo se interpreta un proteinograma de un perro tratado de leihsmaniosis?

R.: La electroforesis de proteínas séricas es una importante fuente de información para monitorizar la evolución de la leishmaniosis canina. Basándose en los datos obtenidos a partir del proteinograma podemos tomar las decisiones terapeúticas oportunas. Los siguientes ejemplos deben dejar claro el criterio a seguir: <br> Caso 1: Animal sin tratar, título IFI 1/400. <br><a href="http://www.lbbarba.es/wp-content/uploads/2014/04/pg1.png"><img src="http://www.lbbarba.es/wp-content/uploads/2014/04/pg1-930x1024.png" alt="pg1" width="930" height="1024" class="alignnone size-large wp-image-693" /></a><br>En la imagen puede apreciarse el enorme pico en la región gamma, con un valor de 3.3g/dl, típico de una leishmaniosis sin tratar. <br><br> Caso 2: Leishmaniosis tratada, con un título de 1/160 <br><a href="http://www.lbbarba.es/wp-content/uploads/2014/04/pg2.png"><img src="http://www.lbbarba.es/wp-content/uploads/2014/04/pg2-930x1024.png" alt="pg2" width="930" height="1024" class="alignnone size-large wp-image-692" /></a><br>Se observa una pseudomeseta ancha y alta en la región gamma, típica de un perro tratado. En estos casos se debe comparar con el proteinograma anterior al tratamiento con el fin de valorar si se trata nuevamente. El valor de la gamma globulina fue 1.7g/dl <br><br>Caso 3: Leishmaniosis tratada con título 1/40<br><a href="http://www.lbbarba.es/wp-content/uploads/2014/04/pg3.png"><img src="http://www.lbbarba.es/wp-content/uploads/2014/04/pg3-930x1024.png" alt="pg3" width="930" height="1024" class="alignnone size-large wp-image-692" /></a><br> Se observa que la banda gamma es casi normal, con una meseta estrecha y baja. El título obtenido fue 1/40. El valor obtenido fue 0,9g/dl, interpretándose el tratamiento como exitoso.

P.: ¿Se puede transmitir la leishmaniosis por via transplacentaria?

R.: Los estudios científicos demuestran que esta enfermedad puede transmitirse aunque los datos son preliminares debido al pequeño número de casos estudiado. <br>(1) *Boggiatto PM, Gibson-Corley KN, Metz K, Gallup JM, Hostetter JM, Mullin K, Petersen CA. Transplacental Transmission of leishmania infantum as a Means for Continued Disease Incidence in North America. PLoS Negl Trop Dis. 2011 Apr 12;5(4):e1019.

P.: ¿Se puede curar el herpesvirus canino? ¿Con qué síntomas cursa? ¿Cómo saber si un aborto o una muerte perinatal está producida por este virus?

R.: Los perros contagiados de herpesvirus quedan como portadores para toda su vida, casi siempre asintomáticos. En la fase aguda de la infección normalmente no aparecen más que algunos síntomas respiratorios leves y conjuntivitis leve. La prueba de elección para el diagnóstico es una PCR en hisopado vaginal o prepucial.

P.: ¿Qué prueba debo elegir para diagnóstico de Parvovirosis canina?

R.: Los criterios son los siguientes: 1. Si el perro hace MENOS de 2 días que tuvo el primer síntoma (vómito o diarrea): Parvovirus antígeno en heces. 2. Si hace 2 días o MÁS: 2.1. Si el perro se vacunó de parvovirus hace 2 meses o más: Parvovirus IgM en plasma o suero. 2.2. Si el perro se vacunó hace menos de 2 meses: Parvovirus PCR en heces. NOTA: existe algún estudio que habla de la posibilidad de que puedan existir algunos casos de interferencia de una vacunación reciente con la prueba de PCR, pero se trata de casos excepcionales.

P.: ¿Se puede transmitir la leishmaniosis a través del semen?

R.: Aunque se han hecho pocos estudios experimentales, en los realizados se ha comprobado que existe esta posibilidad, encontrando probabilidades de contagio que oscilan entre el 25 y el 50%.

Pregunta: ¿Cómo se puede discriminar si un perro o un gato es criptórquido o está castrado?

Respuesta: Hay tres opciones: 1. Determinación basal de hormona antimulleriana. Necesitamos 1 ml de suero congelado poco después de la extracción. 2. Estimulación con GnRH. Se inyectan 2.2 mcg/kg (microgramo/kg) intramuscular. Se toma muestra basal y 2 horas después. Solo aplicable para perros. 3. Estimulación con 250 IU de hCG subcutánea. Se toma muestra basal y 2 horas después.

P.: ¿Cómo realizo una estimulación con ACTH para diagnóstico de síndrome de Cushing en perros?

R.: Se toma una muestra de sangre basal; sirve cualquier tipo de tubo. No hace falta que el animal esté en ayunas. La cantidad mínima de sangre es 0.2 ml. A continuación se inyecta por vía IM o IV 0.25 mg de ACTH sintética sea cual sea el peso del perro. Se espera 1 hora o 2 horas y a continuación se extrae otra muestra de sangre.

P.: ¿Cómo realizo una supresión con dexametasona a bajas dosis para diagnóstico de síndrome de Cushing en perros?

R.: Se toma una muestra de sangre basal; sirve cualquier tipo de tubo. No hace falta que el animal esté en ayunas. La cantidad mínima de sangre es 0.2 ml. A continuación se inyecta por vía IV 0.01 mg/kg de dexametasona. Se toman muestras a las 3 y a las 8 horas.

P.: ¿Cuál es el protocolo para la monitorización del tratamiento con trilostano de un síndrome de Cushing?

R.: Deben obtenerse muestras para análisis bioquímicos (incluyendo electrolitos) y realizarse pruebas de estimulación con ACTH antes de iniciar el tratamiento, a los 10 días, las 4 semanas y las 12 semanas de éste y, más tarde, cada tres meses, tanto después del diagnóstico inicial como tras los ajustes de la dosis. Es obligatorio realizar pruebas de estimulación con ACTH a las 4-6 horas de la administración para poder interpretar los resultados adecuadamente. También debe efectuarse una evaluación periódica del progreso clínico de la enfermedad en todos los puntos temporales mencionados. En el caso de obtener un test de estimulación de ACTH con resultado no estimulatorio durante la monitorización, el tratamiento debe suspenderse durante 7 días y reiniciarlo a una dosis menor. Debe repetirse el test de estimulación de ACTH transcurridos otros 14 días. Si el resultado es todavía no estimulatorio, detener el tratamiento hasta que remitan los signos de hipoadrenocorticismo. Repetir el test de estimulación de ACTH un mes tras la reanudación del tratamiento. Si el animal está clínicamente bien y los valores post estimulación están por encima de 1.5 ug/dl se debe mantener el tratamiento. En caso de que el valor de cortisol post-estimulación esté por encima de 9 ug/dl y clínicamente esté bien el animal debe ser estrechamente monitorizado por si hubiera que subirle la dosis. Si están por encima de 1.5 ug/dl y persisten los síntomas se debe evaluar el subir la dosis, especialmente en si los valores post-estimulación están por encima de 6 ug/dl. En la monitorización con trilostano se puede utilizar, en caso de animales que aparentemente estén respondiendo bien al tratamiento, o animales que solo manifiesten síntomas de hiperadrenocorticismo, la medición de cortisol basal previo a la administración de trislostano como alternativa más simple al protocolo anterior. Puede consultar más detalles en <a href="http://www.lbbarba.es/wp-content/uploads/2019/04/CORTISOL-PRE-Vetoryl-ALGORITMO-DECHRA.pdf">protocolo del fabricante de Vetoryl</a>

P.: ¿Cuánto tardan las determinaciones de progesterona?

R.: Dada la premura que suelen requerir estas determinaciones, disponemos de un servicio express sin coste adicional mediante el cual los resultados están disponibles tan solo dos horas después de que la muestra llegue al laboratorio, siempre y cuando se solicite previamente. En otro caso los resultados están disponibles entre las 17 y las 19 horas, excepto sábados en que están disponibles hacia las 14 horas.

P.: ¿Cómo se puede saber si una perra o gata está esterilizada o tiene restos ováricos?

R.: Existen básicamente dos métodos. El primero, más simple, es realizar una determinación de estradiol basal. Sin embargo, un pequeño número de hembras pueden presentar valores dudosos. El segundo método es realizar una estimulación con GnRH. Se inyecta por vía IM 0.12 (perra) o 0.4 (gata) ug/kg de GnRH y se toma muestra basal y a los 120 minutos. En ambas muestras se determina estradiol.

P.: ¿Cómo se realiza una estimulación con hCG para saber si un caballo está castrado o es criptóquido?

R.: Se toma una muestra basal de suero. A continuación se inyecta por vía IV 6.000 UI de hCG. 24 horas después se vuelve a tomar muestra de suero. En ambas muestras se solicita la determinación de testosterona.

P.: ¿Qué protocolo se usa para diagnosticar Cushing en orina?

R.: La prueba presuntiva se realiza con una orina basal matinal (la primera del día). Si se desea, especialmente en gatos, se puede realizar una supresión con dexametasona como alternativa a las pruebas en sangre. El protocolo consiste en tomar los días 1 y 2 la primera orina del día, que se congela. El día 2 se administran tres dosis de dexametasona (0.01 mg/kg) por vía oral cada 6 horas, y el día 3 se toma otra vez la primera orina de la mañana.

P.: ¿Cómo se puede diagnosticar un insulinoma?

R.: Se pueden realizar varias pruebas de laboratorio. Como pruebas de screening se pueden determinar niveles de glucemia basal, fructosamina y ratio insulina:glucosa. También se puede realizar la prueba de sobrecarga de glucosa. El protocolo es el siguiente: tras un ayuno de al menos 12 horas se administra, por vía IV 0.5 g/kg de glucosa. Se toman muestras de sangre a tiempo 0, 5, 15, 30 y 45 minutos. En todas las muestras se determina glucosa e insulina. Se debe enviar la muestra como plasma centrifugado y recogido en heparina-litio o EDTA. Lester, N. V., Newell, S. M., Hill, R. C., & Lanz, O. I. (1999). Scintigraphic diagnosis of insulinoma in a dog. Veterinary Radiology & Ultrasound, 40(2), 174-178.

Pregunta: He tenido varios casos de contajes bajos de plaquetas, sin causa aparente justificada. ¿Qué puede estar ocurriendo?

Respuesta: En general estos problemas suceden porque o bien ha pasado mucho tiempo desde el inicio de la extracción de sangre hasta que se ha introducido ésta en el tubo con anticoagulante o porque el tubo no se ha movido el suficiente tiempo después de introducir la sangre en él. Se debe voltear con suavidad <b>durante 60 segundos</b>, ya que si no el riesgo de que se agreguen las plaquetas o se coagule la sangre es importante.

P.: He tenido varios casos en que la sangre se ha coagulado, sin causa aparente justificada. ¿Qué puede estar ocurriendo?

R.: En general estos problemas suceden porque o bien ha pasado mucho tiempo desde el inicio de la extracción de sangre hasta que se ha introducido ésta en el tubo con anticoagulante o porque el tubo no se ha movido el suficiente tiempo después de introducir la sangre en él. Se debe voltear con suavidad <b>durante 60 segundos</b>, ya que si no el riesgo de que se agreguen las plaquetas o se coagule la sangre es importante.

Pregunta: ¿Es necesario refrigerar las muestras para pruebas de genética (PCR)?

Respuesta: No, no es necesario

P.: ¿Los escobillones se deben enviar con medio de transporte?

R.: Sí, siempre que el medio no contenga carbón activo (es de color negro)

P.: ¿En los perros que presentan la mutación del gen MDR1 qué medicamentos hay que tener en cuenta?

R.: MDR1 - Sensibilidad medicamentos gen mdr1 La sensibilidad de los collies, y algunas otras razas con antecesores comunes, a ciertos medicamentos es debida a un desorden genético. Una mutación en el gen MDR1 (gen de resistencia a multidrogas) que codifica para la glicoproteína P hace que no se produzca esta proteína, necesaria para el transporte de muchos medicamentos a través de la sangre hacia distintos órganos del cuerpo. Aproximadamente un 35% de los collies son “puros” para la mutación, es decir que llevan la mutación en las 2 copias del gen, la de origen paterno y la de origen materno; esto hace que puedan sufrir unos efectos tóxicos agudos y muchas veces fatales cuando se les administran algunos medicamentos en dosis altas o incluso muchas veces en dosis menores a las que se usan normalmente sin problemas en los perros de otras razas. Drogas para las que se ha publicado que causan problemas en los perros con la mutación en el gen MDR1 Ivermectina (agente antiparasitario): Se ha descrito toxicidad neurológica con una única dosis de 100 microgramos por Kg. de peso corporal en los collies homocigotos para la mutación y con dosis de 300 microgramos por Kg. de peso corporal aplicadas a diario (tratamiento de la sarna demodécica) en los collies heterocigotos. En los collies normales (sin la mutación) no hay toxicidad ni con una única dosis de 2000 microgramos por Kg. de peso corporal ni con dosis de 300 microgramos por Kg. de peso corporal aplicadas a diario durante meses. Doramectina y abamectina (agentes antiparasitarios): Lo mismo que lo descrito para la ivermectina. Milbemicina, moxidectina y selamectina (agentes antiparasitarios): De modo similar a las anteriores, estas drogas pueden causar toxicidad neurológica en perros con la mutación. Aunque hay trabajos en que se asegura que la dosis oral para la prevención de la filariosis (gusano del corazón) puede ser administrada sin riesgo, en otros trabajos se relaciona la utilización de dosi s más elevadas, incluyendo la inyección para la prevención de la filariosis durante 6 meses, con neurotoxicidad aguda y muerte en los collies portadores de la mutación. Como los resultados de los trabajos sobre la prevención de la filariosis con estas drogas son contradictorios y equívocos se recomienda no utilizarlas a no ser en perros que se hayan analizado y se sepa que están libres de la mutación. En cuanto a la aplicación tópica de la selamectina para la prevención de la filariosis, que se suele asegurar que no tiene riesgos, se ha publicado el caso de la muerte de un pastor australiano a causa de dicho tratamiento, y aunque este hecho se publicó como anecdótico hay que tener en cuenta que esta raza es otra de las que portan la mutación en el gen MDR1. Loperamida (agente antidiarreico, nombres comerciales: Fortasec, Salvacolina…): A la dosis utilizada para tratar las diarreas, esta droga produce toxicidad neurológica en los perros con la mutación. Esta droga debe ser evitada en todos los perros portadores de la mutación. Acepromacina (tranquilizante y agente de preanestesia): En los perros con la mutación tiende a producir una sedación más profunda y prolongada. Se recomienda reducir las dosis un 25% en los perros heterocigotos para la mutación y un 30-50% en los perros homocigotos para la mutación. Butorfanol (analgésico y agente de preanestesia): De forma similar a la acepromacina, el butorfanol produce una sedación mas profunda y prolongada por lo que se recomienda reducir la dosis como en el caso anterior (en los mismos porcentajes). Vincristina, vinblastina y doxorubicina (agentes de quimioterapia): Con respecto a estos medicamentos y basándose en algunos datos publicados, parece que los perros con la mutación son más sensibles, sobre todo en lo que respecta a su probabilidad de sufrir reacciones adversas a estas drogas. En los perros portadores de la mutación se ha descrito un descenso acusado de las células sanguíneas, sobre todo neutrófilos, y otros signos de toxicidad como anorexia, vómitos y diarreas a las dosis normales de tratamiento. Para reducir la probabilidad de estas reacciones adversas y reducir los efectos tóxicos de estas drogas se recomienda reducir la dosis un 25 a 30% (tanto en los collies homocigotos como en los heterocigotos para la mutación) y vigilar muy estrechamente a los perros en tratamiento. Drogas que parecen no tener efectos perjudiciales para los perros portadores de la mutación MDR Ciclosporina (agente inmunosupreosr) y digoxina (droga cardiaca): No se ha descrito una mayor sensibilidad a estas drogas en los perros portadores de la mutación en el gen MDR1. Sin embargo, y aunque no se recomienda reducir la dosis, si se recomienda supervisar muy cuidadosamente a los perros afectados por la mutación durante el tratatamiento con estas drogas. Doxiciclina (droga antimicrobiana): No se ha documentado ningún incremento en la sensibilidad a esta droga en los perros con la mutación por lo que no se recomienda alterar la dosis en dichos perros. Morfina, buprenorfina y fentanil (analgésicos opioides o medicamentos contra el dolor): Se sospecha que estas drogas son transportadas por la Gp-P en los perros porque se ha comprobado que lo son en la especie humana, pero no se han descrito casos de toxicidad causada por estas drogas en los perros con la mutación. No se hacen recomendaciones específicas para dichos perros. Drogas de las que no se dispone de suficiente información pero para las que se recomienda una gran precaución cuando sean administradas a los perros portadores de la mutación en el gen MDR1 Agentes de quimioterapia: mitoxantrona, dactinomicina, paclitaxel y etopósido; antibióticos: eritromicina, geparfloxacina,esparfloxacina y rifampicina; drogas cardiacas: digoxina, digitoxina, quinidina, diltiazem y verapamil; esteroides: dexametasona yestradiol; medicamentos usados en gastroenterología: cimetidina, ranitidina, domperidona y ondansetrón; antiepilépticos:fenitoína. Aparte de estas hay otras drogas que se sabe que son transportadas por la Gp- P codificada por el gen MDR1 pero de las que tampoco se tienen datos acerca de sus efectos en los perros portadores de la mutación en dicho gen. Interacciones entre distintos medicamentos cuando se administran conjuntamente La capacidad de la glicoproteína P para interactuar con un amplio rango de fármacos distintos juega un papel muy importante en la toxicidad de los mismos. Se han descrito interacciones potenciando el efecto de distintos fármacos cuando son administrados conjuntamente, por ejemplo en la administración conjunta de ivermectina y verapamil, o moxidectina y loperamida. También se han descrito interacciones importantes por la administración conjunta de digoxina y claritromicina, digoxina y verapamil, y digoxina e itraconazol. En estos casos se detectó una disminución en la eliminación y un aumento en el nivel en sangre y en la vida media de la digoxina comparados con el efecto de la digoxina sola. Y en cuanto a los fármacos antimicrobianos, las tetraciclinas, los macrólidos y las quinolonas también han mostrado interacciones con otros fármacos transportados por la Gp-P. Por ejemplo la rifampicina puede alterar los efectos de otros sustratos de la proteína que sean administrados tras el uso prolongado de esta droga; y los antifúngicos ketoconazol e itraconazol también pueden alterar los efectos de otras drogas como la digoxina, o pueden ver modificado su propio comportamiento cuando son administrados con otros sustratos como la rifampicina. Los cuadros de toxicidad producidos por la loperamida en los collies aumentan sus efectos colaterales cuando el antidiarreisco se administra conjuntamente con quinidina. Y drogas inmunosupresoras como la ciclosporina, y esteroides como la dexametasona y la progesterona, también producen complejas interacciones cuando son administrados con otros sustratos de la Gp-P En resumen Hay que tener muchísimo cuidado con todos estos medicamentos que son sustrato de la Gp-P en los collies, a no ser que sepamos que no son portadores de la mutación en el gen MDR1, cosa hoy por hoy complicada pues en nuestro país aun no se están haciendo los correspondientes análisis de ADN para poder ponerla de manifiesto. Que un medicamento no haya resultado tóxico para un collie no quiere decir que no vaya a resultar tóxico para otro. Por una parte porque no conocemos el genotipo del primero, no sabemos si es portador o no de la mutación, y por otra parte porque aunque ambos tuviesen el mismo genotipo mutante para el gen MDR1, el efecto del medicamento podría ser diferente debido a las interacciones entre medicamentos descritas antes, que pueden ser distintas para ambos perros. Y que un medicamento no haya resultado tóxico para un collie una vez, no significa que no vaya a resultar tóxico para ese mismo perro cuando vuelva a ser administrado otra vez. Por una parte porque las interacciones con otros medicamentos pueden ser distintas en ambos casos y por otra parte porque es posible que el efecto de la dosis sea acumulativo ya que al no disponer de la Gp-P, responsable del transporte y la eliminación de los medicamentos, estos pueden permanecer por largo tiempo en el organismo.

Pregunta: ¿Es necesario refrigerar las heces para pruebas de parasitología o digestión?

Respuesta: No, no es necesario

P.: ¿Es necesario refrigerar las muestras para cultivo?

R.: Si son escobillones con medio de transporte, heces o pelo no se deben refrigerar. En el caso de tejidos u orinas sí que es necesario

P.: ¿Cómo se utiliza la ivermectina en los tratamientos de parásitos externos en perros?

R.: Se administra una dosis de 0.15 mg/kg peso por vía oral y se repite 14 días después

P.: ¿Cómo puedo diagnosticar un síndrome de Fanconi en un perro o un gato?

R.: Se debe pedir la prueba de aminoácidos en orina